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土壤總磷/有機(jī)磷/無(wú)機(jī)磷含量測(cè)定試劑盒說(shuō)明書(shū)

更新時(shí)間:2025-02-05      瀏覽次數(shù):826


土壤總磷/有機(jī)磷/無(wú)機(jī)磷含量測(cè)定試劑盒說(shuō)明書(shū)

分光光度 50 /48 

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定測(cè)定意義:

土壤總磷包括有機(jī)磷和無(wú)機(jī)磷,其中無(wú)機(jī)磷能夠直接被植物利用。土壤有機(jī)磷經(jīng)過(guò)礦化分解而轉(zhuǎn)化為無(wú)機(jī)磷。同時(shí)測(cè)定土壤總磷、有機(jī)磷和無(wú)機(jī)磷,可以全面反映土壤磷營(yíng)養(yǎng)狀況。

測(cè)定原理:

利用鉬藍(lán)法定磷。取一份土樣,通過(guò)浸提法測(cè)定土壤無(wú)機(jī)磷含量;另外取一份土樣,經(jīng)高溫灼燒后,土壤有機(jī)磷轉(zhuǎn)化為無(wú)機(jī)磷,測(cè)得土壤總磷含量;總磷含量減去無(wú)機(jī)磷含量,即可計(jì)算??有機(jī)磷含量。

試劑組成和配制:

 

產(chǎn)品名稱

BO6050-50T/48S

Storage

試劑一:液體

1

4℃

試劑二:液體

1

4℃

試劑三:粉劑

1

4℃避光

標(biāo)準(zhǔn)品:液體

1

4℃

說(shuō)明書(shū)

一份

試劑一:液體×1 瓶,4℃保存。臨用前用蒸餾水稀釋 10 倍后再用。

試劑三:粉劑×1 瓶,4℃避光保存。臨用前配制,加入 20 ml 蒸餾水,充分溶解后加入 10 ml 試劑二,混勻。

標(biāo)準(zhǔn)品:液體×1 支,20 μ mol/L 無(wú)機(jī)磷標(biāo)準(zhǔn)品,4℃保存。

自備儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式水浴鍋,分析天平、可調(diào)式移液器、550℃高溫電爐,1ml 玻璃比色皿、蒸餾水、100 目篩子(可更小)。

土壤不同形態(tài)磷提取:

1. 無(wú)機(jī)磷:稱取通過(guò) 100 目篩子的風(fēng)干土樣 0.1g,轉(zhuǎn)移到 10 ml 離心管,加入 10ml 試劑一,震蕩混勻,然后置于 45℃水浴 1h8000g25℃離心 10min,取上清液一,用于無(wú)機(jī)磷含量測(cè)定。

2. 總磷提取:取通過(guò) 100 目篩子的風(fēng)干土樣,550℃灼燒 1h,冷卻后稱取約 0.1g,轉(zhuǎn)移到 10 ml 離心管,加入 10ml 試劑一,震蕩混勻,然后置于 45℃水浴 1h8000g25℃,離心 10min,取上清液二,用于總磷含量測(cè)定。

測(cè)定步驟:

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱 30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到 660 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 打開(kāi)水浴鍋,調(diào)節(jié)溫度到 40℃

3. 空白管:取EP 管,依次加入 500μl 蒸餾水,500μl 試劑三,混勻后置于 40℃水浴保溫 10min,室溫冷卻 10 min 后于 660 nm 測(cè)定吸光度,記為A 空白管。

4. 標(biāo)準(zhǔn)管:取EP 管,依次加入 50μl 標(biāo)準(zhǔn)液,450μl 蒸餾水,500μl 試劑三,混勻后置于 40℃水浴保 10min,室溫冷卻 10 min 后于 660 nm 測(cè)定吸光度,記為A 標(biāo)準(zhǔn)管。

5. 測(cè)定管:取 EP 管,依次加入 50μl 上清液一或者上清液二,450μl 蒸餾水,500μl 試劑三,混勻后置 40℃水浴保溫 10min,室溫冷卻 10 min 后于 660 nm 測(cè)定吸光度,記為A 測(cè)定管。

注意事項(xiàng):

1、空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。

2、試劑三配制過(guò)程中,可能會(huì)產(chǎn)生黑色固體,其不影響結(jié)果,注意吸取時(shí)不要將黑色固體吸入。

土壤磷含量計(jì)算:

1. 土壤無(wú)機(jī)磷含量(μmol /g=[C 標(biāo)準(zhǔn)液×(A 測(cè)定管-A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管)]×V ÷W=0.2×(A 測(cè)定管-A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管)÷W

C 標(biāo)準(zhǔn)液:20 μmol/L W:土壤樣品質(zhì)量,g V 總:上清液一總體積,10 ml=0.01 L

2. 土壤總磷含量(μmol /g 干重)=[C 標(biāo)準(zhǔn)液×(A 測(cè)定管-A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管)]×V 

÷W=0.2×(A 測(cè)定管-A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管)÷W

C 標(biāo)準(zhǔn)液:20 μmol/LV 標(biāo)準(zhǔn)液:50μl=0.05 mlW:土壤樣品質(zhì)量,gV 總:上清液二總體積,10 ml=0.01 L

3. 土壤有機(jī)磷(μmol /g=土壤總磷-土壤無(wú)機(jī)磷


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